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2016年《开学第一课》，在新生代组合TFBOYS演唱的主题曲《第一课》中，正式拉开序幕。TFBOYS表示，和同学们一起作为新时代的接班人，共同聆听老兵们在长征路上可歌可敬的故事，传承长城精神，感受信仰的力量，受益匪浅。

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随后，在撒贝宁、董卿、何炅三位老师的带领下，大家一起探寻了“信念不移、勇往直前、百折不挠、坚持不懈”的长征精神。

节目还邀请了多位亲历长征、平均年龄逾百岁的老红军参与，讲述长征故事、弘扬长征精神，给青少年以价值观的启迪和引导。同时辅以孩子们喜闻乐见的文艺表演和互动游戏，力争给全国中小学生献上一堂生动而有意义的第一课。